第十六章 GCCGCCAGTTCC
傍晚,他被接二連三的電話吵醒。三家測序公司全都散發(fā)著大號拖延癥的氣質(zhì),像是約好了一樣,在承諾時效的前一天晚上才和他溝通。
溝通的內(nèi)容無非就是懷疑樣本被污染了,所以提前聲明不對測序結(jié)果的解讀負(fù)責(zé)。
盧赫見怪不怪地一頓“嗯嗯啊啊好好好”迅速把他們都給打發(fā)了,隨后郵箱被測序報告塞滿。
他從床上爬起來,穿戴整齊,甚至用梳子蘸水梳了頭發(fā)。
隨后他鄭重地走下樓,走進(jìn)細(xì)胞間,一屁股坐在電腦前,伸手去手撈椅背,把正在忙碌的菜菜一把拽了過來。
“歇會兒歇會兒,陪我吃瓜?!?p> 這次他們率先打開了基因組原始數(shù)據(jù)。基準(zhǔn)30億個堿基對,有效分析了30億個堿基對。GC含量57%。
怎么還是這么高?
兩人的腦袋湊在一起,緊盯著屏幕上緩緩滑過的密密麻麻的字符。這次依然是滿屏的紅和綠,但紅多綠少。
“停!”菜菜指著剛掠過的一段字符驚呼,“你看這段,GCCGCCAGTTCC,這不是終止子嗎?”
盧赫定睛一看,“是啊,這是轉(zhuǎn)錄終止修飾點,而且是依賴Rho因子[1]的的轉(zhuǎn)錄終止。”
“終止,好多終止,全是終止!”菜菜又一次驚呼,“停!這段,GC區(qū)[2]下游怎么沒有TATA區(qū)[3]啊。我只知道組蛋白可以沒有GC區(qū),這沒有TATA區(qū)的是什么鬼???”
鼠標(biāo)繼續(xù)翻動,兩人逐漸陷入沉默。
許久之后,盧赫打破了這死寂的氣氛,但從他嘴里說出的并不是菜菜所期待的正經(jīng)話。
“真是離譜他媽給離譜開門,離譜到家了?!彼吀锌咟c開了剛剛下載好的線粒體基因,在軟件加載期間合了好幾下眼。
軟件加載完成,線粒體基因沒有太多注釋,可翻了幾下后,兩人還是猶如半截木頭般僵在那里。從地下室天窗投射出的一縷橙紅色的陽光,緩緩從盧赫的臉上掠過,他連眼睛都沒眨一下。
漸漸的,天色完全暗下來,電腦屏幕上反射出天花板上白熾燈管的輪廓,正好遮擋住屏幕的正中央。
“GGAGGGCGAGGCTCCGTCCTAGCCTTG。。?!北R赫偏了偏頭,默念著其中的一段堿基序列,重啟電腦進(jìn)了Linux,然后在命令行下快速敲擊。
一頓操作下來,他揉著脖子對著黑色背景下一格一格往前爬的亮白色進(jìn)度條沉思。一旁的菜菜瞇著眼睛念出命令行中的小字:“CRISPR。。。Cas。。。Finder?你不會真以為他會有CRISPR系統(tǒng)吧?這太荒誕了。”
盧赫揉亂了自己的頭發(fā),“葫蘆上藤上結(jié)南瓜。咱們搞研究的,總得有點兒想象力吧?!?p> 不一會兒,軟件裝好了。他在命令行敲出一大行命令:perl CRISPRCasFinder.pl -in Stupid_Turtle.fna -out Stupid_Turtle_crispr_cas -def General -cas -ccvr -ccc -gscf -keep -html -cpuM 32 -cpuP 32 -xr 555 -md 50 -t 50
按下回車鍵后,藏在桌子背面的大機(jī)箱嗡嗡地運轉(zhuǎn)了起來。
“法國人搞出來的開源軟件,能預(yù)測CRISPR序列和Cas的位置。他究竟是不是大細(xì)菌,是什么樣的大細(xì)菌,等會兒一目了然?!?p> 他說完戳了戳還在發(fā)愣的菜菜,“喂,怎么還僵著呢。你對新事物的接受能力完全不行啊??磥砝洗粼谶@兒干體力活也不行,回頭你每周給我做兩次文獻(xiàn)匯報吧。記得看最新的,保準(zhǔn)跟科幻小說一樣給你看得一愣一愣的。”
進(jìn)度條一點一點往前走,即將100%。菜菜目不轉(zhuǎn)睛神色緊張,好像那些閃爍跳躍的格子是追在她身后的怪物,“你別說話了,我緊張,萬一他是外星人怎么辦?”
“哈哈?!北R赫笑出聲來,“你可真是太保守了,你應(yīng)該這樣想:萬一他不是人怎么辦?你之前不是說他是大細(xì)菌嗎?”
正說著,軟件運行完畢,一個本地網(wǎng)頁自動彈了出來。
Confirmed CRISPRs: 31
ID: 01
CRISPR start position: 260130 ---------- CRISPR end position: 260390 ---------- CRISPR length: 260
DR consensus: GGAGGGCGAGGCTCCGTCCGGGCCGGAT
DR length: 28 Number of spacers: 3
ID: 02
......
盧赫稍加瀏覽,連連贊嘆,“嘖嘖嘖,31個,還不少呢?!?p> 身邊的菜菜突然起身,摘掉手套,從-20冰箱里掏出一個帶冰渣的飯團(tuán),扔到了微波爐里。一分鐘后,細(xì)胞間里漸漸彌漫著蛋黃醬的香氣。
她打開微波爐,拿出熱好的飯團(tuán)一屁股坐回電腦前,從抽屜里抽出一張紙,包著飯團(tuán),旁若無人地徑直往嘴邊送。
盧赫在一旁驚地說不出話來。
吃下一大口后,菜菜嘴角帶著飯粒含糊不清地說:“我腦子轉(zhuǎn)不動,我餓了,我缺葡萄糖,我心沒你大,我接受不了?!?p> 盧赫看著面前腮幫鼓鼓囊囊的小倉鼠,不忍責(zé)怪。但他也沒輕易放過她,而是懷著惡趣味幽幽開口:“你知道線粒體夏娃嗎?”
對方連連搖頭,“我只知道Y染色體亞當(dāng)?!?p> “差不多是一個意思。在人類精卵細(xì)胞融合時,只有卵細(xì)胞中的線粒體被保留,因此線粒體基因是母系遺傳。線粒體夏娃在進(jìn)化學(xué)中被認(rèn)為是人類的共同母系祖先,即現(xiàn)在所有人的線粒體基因都來自于她的線粒體。”
“假設(shè),初始種群中有100個女性,或者說是有100個不同的線粒體基因組并且種群數(shù)量保持恒定。如果它們在功能上沒有差別,不造成其它的自然選擇壓力,那么理論上在200代之后,最初100個不同線粒體中只有一個就會擴(kuò)散到整個種群中,其余的全部丟失。這個獨一無二的線粒體的主人,就是線粒體夏娃?!?p> “線粒體基因是十分穩(wěn)定的,每隔600代才能產(chǎn)生具有種群意義的突變。目前,不同種族之間線粒體基因組的差異僅為0.32%。通過追溯不同人種線粒體DNA突變前的原型,線粒體夏娃被鎖定為20萬年前的非洲人。”
盧赫說完,靜靜期待著菜菜的反應(yīng)??蓪Ψ街皇遣灰詾槿坏乜辛艘豢陲垐F(tuán),“所以呢?你是想說不論我膚色多白手氣多好,都跟你一樣是非洲人?”
“你個死腦筋啊?!北R赫點了點自己的太陽穴,“想想,用這兒想想。人類的線粒體都遺傳自同一位祖先,海晝天的和普通人的不一樣,這意味著什么?”
“意味著他不是非洲人?他在20萬年前就和咱們不是一個物種了!”菜菜恍然大悟道。
盧赫欣慰地點了點頭,“還有,你知道線粒體是怎樣誕生的嗎?”
“你不會是想提內(nèi)共生假說吧?”菜菜停止了咀嚼,用紙巾抹掉了嘴角的蛋黃醬。
“沒錯,你終于上道了。具有氧化磷酸化功能的古細(xì)菌,被早期的真核細(xì)胞吞噬后,二者形成共生關(guān)系。古細(xì)菌被困在真核細(xì)胞內(nèi),逐漸演化成為了線粒體。”
盧赫又點了點自己的太陽穴,“你品,你細(xì)品,是不是細(xì)思恐極,還吃得下去嗎?”
菜菜放下了吃得只剩一口的飯團(tuán),取下頭套,揉亂了自己的頭發(fā),“我頭癢,我可能要長腦子了。你的意思難道是,早在15億年前,海晝天就和我們不是一個祖先了,他的祖先吞噬了已演化出CRISPR功能的大細(xì)菌,并且把這個功能保留了下來?”
盧赫點了點頭,“孺子可教也。但這只是其中一種可能,另外一種可能是:他被編輯過?!?p> -------------------------------------
[1]依賴Rho因子的的轉(zhuǎn)錄終止:Rho因子是一種大分子蛋白,可結(jié)合在新生的RNA鏈上,借助水解ATP獲得能量推動自身沿著RNA鏈移動,但移動速度比RNA聚合酶慢。當(dāng)RNA聚合酶遇到終止子時便發(fā)生暫停,Rho因子得以趕上酶。Rho因子與RNA聚合酶相互作用,使RNA、RNA聚合酶與自身一起從DNA上釋放下來,以防占著茅坑不拉屎。
[2]GC區(qū):控制轉(zhuǎn)錄起始的頻率,基本不參與轉(zhuǎn)錄起始位點的確定。
[3]TATA區(qū):確定轉(zhuǎn)錄起始位點,使轉(zhuǎn)錄能夠精準(zhǔn)地開始與結(jié)束。